《植物研究》
1 材料与方法
1.1 实验动物与分组
1.2 主要试剂
1.3 实验方法
1.3.1 新生猪胰岛细胞的分离和培养
1.3.1. 1 供体胰腺的摘取
1.3.1. 2 胰腺消化、胰岛的分离和培养
1.3.2猪肾包膜下胰岛移植
1.3.3 术后管理
1.3.4 术后监测及标本评估
2 结果
2.1 移植术后受体的体质量、血糖及血清肌酐水平变化
2.2 猪肾包膜下胰岛移植物的大体标本
2.3 猪肾包膜下胰岛移植物的染色结果
3 讨论
文章摘要:目的构建新生猪肾包膜下胰岛移植模型,探讨其可行性和潜在应用价值。方法选取9只野生型同胎新生健康杜洛克猪,其中1只为对照(p6307),6只为胰岛移植供体,2只为胰岛移植受体(p6210、p6207)。新生猪胰岛分离、体外培养分化后,行猪肾包膜下胰岛移植术,术后给予他克莫司(Tac)联合西罗莫司免疫抑制治疗。术后监测移植受体的体质量、血糖、血清肌酐水平,术后4周和8周分别处死受体新生猪p6210和p6207、对照新生猪,获取猪肾包膜下胰岛移植物进行病理学染色和胰岛素免疫荧光染色。结果猪肾包膜下胰岛移植术后,受体新生猪的体质量增长相对于对照新生猪明显减慢,并间断性伴有纳差、腹泻等症状;而受体新生猪的血糖、血清肌酐水平相较于术前及对照新生猪无明显变化。受体新生猪p6210肾包膜下可见明显的胰岛团块,病理学染色和胰岛素免疫荧光染色证实胰岛团块具有分泌胰岛素的功能,而受体新生猪p6207肾包膜下未见明显的胰岛团块,病理学染色未见明显胰岛团块,考虑该受体新生猪发生胰岛移植排斥反应导致胰岛定植失败。结论新生猪肾包膜下胰岛移植是可行的,为下一步构建用于异种移植治疗糖尿病终末期肾病的猪胰岛-肾复合供体器官提供前期铺垫。
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